A principal diferença entre a centrifugação da sacarose e do cloreto de césio é que a centrifugação da sacarose é uma técnica poderosa para fracionar macromoléculas, incluindo DNA, RNA e proteínas, enquanto a centrifugação do cloreto de césio é o método mais utilizado para a purificação de adenovírus recombinantes.
A centrifugação é uma técnica útil na separação de misturas através da aplicação de força centrífuga. A centrífuga pode ser descrita como um dispositivo que geralmente é acionado por um motor elétrico que pode colocar um objeto, como um rotor, em movimento rotacional em torno de um eixo fixo.
CONTEÚDO
1. Visão geral e diferença chave
2. O que é centrifugação de sacarose
3. O que é Centrifugação de Cloreto de Césio
4. Centrifugação de sacarose vs cloreto de césio em forma tabular
5. Resumo – Centrifugação de sacarose vs cloreto de césio
O que é centrifugação de sacarose?
A centrifugação da sacarose é uma técnica poderosa para fracionar macromoléculas como DNA, RNA e proteínas. Uma amostra consistindo de uma mistura de macromoléculas de diferentes tamanhos é colocada em camadas na superfície de um gradiente com uma densidade que aumenta linearmente de cima para baixo. Diferente da centrifugação padrão, a centrifugação da sacarose utiliza o método de almofada, que não causa estresse mecânico e permite a coleta de partículas morfologicamente intactas.
Figura 01: Frações de gradiente de sacarose de células vegetais
Nesse processo, um tubo de centrífuga tipo balde oscilante é empacotado com um gradiente de sacarose; seu fundo tem a maior densidade, e o topo tem a menor. Além disso, uma suspensão das partículas é colocada em camadas sobre o topo da solução. Então, a centrifugação pode separar as partículas dentro desse gradiente de acordo com a densidade das partículas.
Além disso, o gradiente de densidade de sacarose é útil para demonstrar os receptores androgênicos que variam em tamanho dependendo do método de preparação e da força iônica. Normalmente, gradientes de sacarose de 5 a 20% são tamponados para valores de pH de 7,5 a 8,0 com ou sem glicerol, tioglicerol e KCl.
O que é Centrifugação de Cloreto de Césio?
A centrifugação com cloreto de césio é a técnica mais utilizada para a purificação de adenovírus recombinantes. Este protocolo geralmente descreve todo o processo desde a etapa de preparação até a clarificação da mistura bruta até a formulação e armazenamento do vírus purificado.
Figura 02: Uma Técnica de Coleta de Amostras da Centrifugação
Como uma solução de moléculas de cloreto de césio pode se dissociar sob alta força centrífuga, os átomos de césio pesados são forçados a se afastar do centro em direção à extremidade externa do tubo. No entanto, a difusão de volta para o topo do tubo ocorre ao mesmo tempo. Portanto, forma um gradiente de densidade raso.
Essa técnica permite que os cientistas separem substâncias dependendo de seu tamanho, forma e densidade. Além disso, quando uma solução de cloreto de césio sofre centrifugação em alta velocidade, um gradiente de densidade estável é formado. Esta técnica é útil na purificação de uma variedade de vírus, que incluem adenovírus, arterivírus, bacteriófago, calicivírus, herpesvírus, reovírus, etc.
Qual é a diferença entre a centrifugação de sacarose e cloreto de césio?
A centrifugação é uma técnica útil na separação de misturas através da aplicação de força centrífuga. A centrifugação de sacarose e cloreto de césio são dois tipos de técnicas de centrifugação. A principal diferença entre a centrifugação da sacarose e do cloreto de césio é que a centrifugação da sacarose é uma técnica poderosa para fracionar macromoléculas, incluindo DNA, RNA e proteínas, enquanto a centrifugação do cloreto de césio é o método mais utilizado para a purificação de adenovírus recombinantes.
A tabela a seguir resume a diferença entre a centrifugação de sacarose e cloreto de césio.
Resumo – Centrifugação de sacarose vs cloreto de césio
Tanto a centrifugação de sacarose quanto de cloreto de césio são tipos de métodos de centrifugação diferencial. A principal diferença entre a centrifugação de sacarose e cloreto de césio é que a centrifugação de sacarose é uma técnica poderosa no fracionamento de macromoléculas, incluindo DNA, RNA e proteínas, enquanto a centrifugação de cloreto de césio é o método mais utilizado para a purificação de adenovírus recombinantes.
Referência:
1. “Gradiente de sacarose.” Uma visão geral | Tópicos ScienceDirect.
Cortesia da imagem:
1. “Frações de gradiente de sacarose de célula vegetal” Por Zuzanna K. Filurowska – Obra própria (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. “Gradiente de densidade” – uploader original Mlw3559 em English Wikibooks. – Transferido de en.Wikibooks para Commons. (CC BY-SA 2.5) via Commons Wikimedia